LSD新生儿筛查方法

• 筛查目标疾病：戈谢病、GSD Ⅱ型、克拉贝病、法布雷病、尼曼匹克病A和B型、黏多糖贮积症Ⅰ型
• 检测指标：检测不同酶的活性或基因筛查相应疾病
• 筛查技术方法
  • 生化筛查：常用串联质谱法，可同时检测多种酶，特异性强
  • 基因筛查：纳入致病基因，实现多种LSD筛查，可弥补法布雷病酶活性筛查漏检女性杂合子不足
• 筛查流程
  • 样本采集与递送：滤纸干血片，与新生儿遗传代谢病筛查共用标本，冷链递送，优先检测
  • 实验室检测：按规范进行方法学评价等
  • 酶活性切值建立：无统一标准，建议动态调整
  • 筛查阳性召回诊断：复测酶活性低于切值判为阳性，召回进行诊断性检查

戈谢病

疾病概况

• GBA1基因变异致ABG缺乏，底物贮积，发病率因地区和人种而异，分非神经病变型、神经病变型和围生期致死型，症状差异大

诊断

• ABG酶活性检测：外周血白细胞ABG酶活性明显降低可确诊
• GBA1基因检测：2条等位基因均发现致病变异可明确诊断和预测分型，注意避开假基因干扰
• 生物标志物检测：血Lyso - Gb1灵敏度和特异度接近100%，可辅助诊断、监测进展和观察疗效

分型

• 结合基因型、生物标志物和临床表现初步分型，部分GBA1基因变异与临床分型相关

治疗及随访

• Ⅱ型病情重，现有治疗效果差，HSCT不能完全阻止Ⅲ型癫痫
• 定期检测血Lyso - Gb1判断严重程度，非Ⅱ型患儿定期评估相关指标
• ERT：Ⅰ型适时开始，Ⅲ型尽早开始
• 分子伴侣：盐酸氨溴索用于Ⅱ和Ⅲ型治疗
• 底物减少疗法：酒石酸艾格司他胶囊用于成人Ⅰ型
• HSCT：纠正酶缺陷，Ⅲ型早期行HSCT效果待观察

GSDⅡ型（庞贝病）

疾病概况

• GAA基因变异致酸性GAA活性缺乏，糖原沉积，分婴儿型和晚发型，发病率约1/20 000，晚发型多见

诊断

• GAA活性测定：外周血淋巴细胞等GAA活性显著降低有诊断意义，注意假性缺陷变异位点；滤纸干血片和外周血淋巴细胞检测是一线方法
• GAA基因检测：检出纯合或复合杂合变异是重要依据/诊断依据，不同种族和类型/临床表型有特定变异，注意假性缺陷变异位点
• 生物标志物检测：血CK、脑钠肽或脑钠肽前体、尿Glc4可辅助诊断和评估；血CK增高是婴儿型敏感指标，脑钠肽或前体增高提示心功能不全，尿Glc4水平增高可预测疾病严重程度及评估治疗效果
• 心脏检查：经典婴儿型新生儿期心脏受累，晚发型无明显受累；可选择胸X线片、心电图和心脏超声检查

分型

• 根据GAA缺陷程度、发病年龄及心脏是否受累分型
• 新生儿筛查阳性且符合特定条件可快速诊断婴儿型，无明显心脏受累者待GAA基因检测结果分型
• GAA基因检测显示2个重型变异提示婴儿型，携带1个轻型变异提示晚发型，可根据基因型预测CRIM状态

治疗及随访

• 早期诊断和ERT可改善婴儿型生长发育和晚发型呼吸功能等，定期评估相关指标
• ERT：婴儿型确诊后尽早开始，阿糖苷酶α有不同剂量方案，治疗后定期多学科评估；晚发型定期监测，符合条件开始ERT，注意相关评估
• 心肌病：根据超声结果选择不同治疗方案
• 呼吸系统：采取相关护理措施，在医生指导下选择通气治疗
• 营养支持：保证能量和营养素摄入，选择辅助喂养方法
• 康复训练：选择适量个体化功能训练，避免高强度运动和过度劳累

克拉贝病

疾病概述

• 因GALC基因变异导致GALC活性缺乏，中枢和外周神经系统均有脱髓鞘性改变
• 分为早发型（婴儿型）和晚发型（婴幼儿型、青少年型、成人型），不同类型有不同临床表现
• 新生儿筛查后晚发型比例增加

诊断

• 外周血GALC酶活性检测：患者酶活性低于正常值10%，检测有较高假阳性率，对分型无价值
• 血PSY检测：PSY是生物标志物，用于分型，干血片酶活性低下且PSY>10 nmol/L高度怀疑婴儿型
• GALC基因检测：不同种族基因热点变异不同，与临床表型相关
• MRI：脑弥散张量成像是首选影像学检查方式，头颅和脊髓MRI有相应异常表现
• 脑电图：婴儿型早期正常，后期出现背景慢波和癫痫波
• 脑脊液：婴儿型早期脑脊液蛋白含量高
• 电生理：运动神经传导速度低，脑干和视觉诱发电位异常

分型

• 新生儿干血片酶活性低下后检测血PSY和基因，PSY>10 nmol/L与婴儿型有关，发现2个与婴儿型相关致病性变异支持婴儿型诊断，确诊婴儿型出生后数周有相关表现

治疗及随访

• 早发婴儿型符合条件是HSCT最佳指征，不同年龄段患者有不同治疗建议
• 避免联合使用多种抗癫痫药物和第二代抗精神病类药物，儿童疫苗接种可能加速疾病进展

法布雷病

疾病概述

• 因GLA基因变异导致α-Gal A活性缺乏，主要累及多器官
• 分为经典型和迟发型，发病率及不同类型表现不同

诊断

• α-Gal A酶活性检测：干血片检测仅作筛查，活性低下进一步检测外周血血浆或白细胞活性，酶活性降低需进行GLA基因变异检测，部分女性患者酶活性正常
• GLA基因检测：是重要辅助确诊方法，对疑似女性患者更重要
• 生物标志物Lyso-Gb3测定：经典男性患儿出生后血Lyso-Gb3升高，与疾病严重程度正相关，对女性晚发型诊断价值偏低
• 尿液检测：定期监测有助于早期发现肾脏受累

分型

• 经典型血α-Gal A活性极低，迟发型酶活性较高，不同基因变异类型与临床分型相关
• 无法明确分型的新生儿筛查阳性儿结合家系调查和随访判断

治疗及随访

• 筛查阳性儿评估
  • 怀疑经典型或分类不明：每年评估血管角化瘤等症状，每半年评估血Lyso - Gb3水平
  • 明确迟发型：成年后酌情监测评估
• 治疗启动
  • 经典型：出现首个临床表现时开启特异性治疗；国际建议无症状患儿1 - 2岁启动ERT
• 治疗目标：延缓疾病进展，改善生活质量，降低并发症发病率，延长生存期
• 治疗方法
  • 特异性治疗
    • ERT：阿加糖酶β 1.0 mg/kg，每2周静脉输注1次；阿加糖酶α 0.2 mg/kg，每2周静脉输注1次
    • 分子伴侣疗法：米加司他，仅适用于部分错义变异患者，国内未获批
  • 对症治疗：多种药物针对不同症状，如苯妥英钠等减轻肢体疼痛，肾衰竭期透析或肾移植等

NPA和NPB（尼曼匹克病A和B型）

疾病介绍

• 病因：SMPD1基因变异致酸性鞘磷脂酶缺乏
• 发病率：国际1/100 000 - 1/20 000；中国估计1/10 000
• 分型：神经型NPA、非神经型NPB和中间型
• 种族差异：犹太人NPA多，阿拉伯等和中国NPB多，中国神经型占15% - 20%，非神经型占60% - 70%

诊断

• ASM活性检测：干血片仅作筛查，活性低时检测外周血白细胞ASM活性
• SMPD1基因检测：确诊依据，中国人有常见多态性和变异
• 生物标志物检测：血浆SPC和7 - KC与疾病严重程度相关
• 其他血生化检测：贫血、血小板降低等多项异常

分型

• 基因型指示：部分基因型与疾病分型有关
• 血浆标志物：7 - KC及SPC水平与病情相关

治疗及随访

• 治疗：HSCT对NPA早期患儿获益待研究，重组人酸性鞘磷脂酶治疗非神经系统病变
• 随访：无明显症状者定期监测，注意肝脏纤维化、脾脏增大等，建议低脂饮食等

MPS Ⅰ型（黏多糖贮积症Ⅰ型）

疾病介绍

• 病因：IDUA基因变异致α - L - 艾杜糖苷酶活性缺乏
• 发病率：世界约1/100 000，欧美高于亚洲，我国华东、华南有占比数据
• 分型：重型、中间型和轻型，中间型和轻型统称亚重型

诊断

• α - L - 艾杜糖苷酶活性检测：显著低于正常有确诊意义，结合GAG定量和IDUA基因检测
• IDUA基因检测：存在种族及地区差异，错义变异与表型有关
• GAG检测：血及尿硫酸皮肤素和硫酸类肝素水平显著增高可用于诊断和评估
• 其他：骨骼X线、头颅MRI等多项检查有典型表现

分型

• 依据：临床表现、尿GAG水平、IDUA基因变异类型
• 重型特征：发病早，进展快，多项早期表现，GAG显著或进行性增高

治疗和随访

• 治疗方案
  • HSCT：重型首选，6月龄前进行
  • ERT：亚重型首选，重型移植等待期及移植后可短期使用
• 随访：定期评估生长发育、尿GAG定量等多项指标

遗传咨询

• 先证者家系：产前诊断或胚胎植入前遗传学检测，结合DNA和酶活性检测
• 无先证者携带者：产前诊断结合DNA分析和酶学检查
• 胎儿检测：根据基因型判断类型并告知治疗方案